本研究以从2个川崎病患儿和2个健康对照儿的外周血中分选的外周单核细胞为目标进行scRNA测序，鉴定了患者和正常样本间单核细胞亚型、功能和分化状态的区别。结果发现健康儿童中鉴定到3个单核细胞亚型，为CD14⁺CD16^-单核细胞、CD14⁺CD16⁺单核细胞及CD14^LowCD16⁺单核细胞，拟时分析发现三个单核细胞亚型呈现线性的分化趋势，且经历不同的生物学功能。而且发现分化较弱且与中性白细胞活性相关的SELL⁺CD14⁺CD16^-单核细胞在KD中呈现扩增。本研究解析了KD中单核细胞的异质性及其变化，并鉴定了相关的生物标记物。

图1.富集的单核细胞的scRNA测序

本研究从一个健康的儿童和一个KD患者的PBMC样本进行scRNA测序，鉴定了12个细胞群。与健康样本比，KD患者的中naive DC8⁺ T 细胞、T helper 细胞和B细胞比例降低，而主要免疫相关的T细胞、NK细胞比例增加。B、T细胞的GO注释分析发现细胞激活、淋巴细胞活化免疫系统调节通路的富集。

图2.PMBC的scRNA测序

本研究采用单细胞RNA测序技术，对7例接受静脉注射免疫球蛋白治疗前后、及3例健康对照样本的PBMC进行研究，揭示了相关的免疫图谱。结果表明，单核细胞是川崎病PBMC中差异表达基因的主要来源，KD患者汇中上调的炎症介质、免疫球蛋白和下调的MHC-II类基因。单细胞RNA测序结果和另外的16例KD患者的流式结果表明尽管KD患者在治疗后总的B细胞降低，但是B细胞中浆细胞的比例则上升；与健康样本相比，KD患者中CD8⁺ T 细胞的比例、特别是记忆CD8 T细胞的比例更低。单细胞免疫组库的结果表明，治疗后KD患者体内均出现单BCR和TCR克隆扩增。本研究揭示了每种细胞类型的潜在生物过程改变，并绘制了川崎病单细胞免疫图谱，为剖析川崎病的发病和治疗机制提供了重要依据，并为进一步筛选诊断和预后的标志物，甚至鉴定川崎病病原体提供了重要的数据资源。

图3.单细胞测序揭示KD患者治疗前后以及健康对照的PBMC细胞图谱

图4.不同条件的主要细胞类型比例比较

图5.单核细胞的基因表达特征

图6.B细胞及BCR的特征

图7.T细胞及TCR特征

这三项研究都是采用单细胞测序来研究川崎病，研究的样本均是PBMC。三篇文章研究有一致之处，也各有侧重。在细胞类型的分析上，都发现单核细胞的改变。NC的文章在样本选择上加入了治疗前后的对照，在研究的策略上还包括了单细胞BCR和TCR，结论也更加深入全面。此类研究取样简单，设计直接，对类似疾病的研究有重要的参考和借鉴意义。