Q1:ATAC-seq技术通常与哪些技术结合起来研究?
ATAC-seq获得的是全基因组处于开放状态的序列,这些序列包含了潜在的调控元件,属于表观遗传学的范畴,它通常与RNA-seq、ChIP-seq、Hi-C等技术相结合,可以深入研究基因表达的调控机制。
Q2:ATAC-seq中细胞器污染的问题如何解决?
起初ATAC-seq获得的开放序列中有很大比例的细胞器数据,后来有文献(Corces etal. 2017)经过条件优化,能将大部分细胞器去除。现在我们的经验表明,动物ATAC-seq序列中比对到线粒体的数据比例低于10%,植物ATAC-seq序列中比对到线粒体和叶绿体的数据比例低于35%,无需担心细胞器污染问题。
Q3:ATAC-seq需要生物学重复吗?测多少数据量?周期如何?
至少需要做2个生物学重复,推荐3个重复。我们采用PE150测序策略,每个样本的测序量20G。周期为40个工作日(2个月)。